Национальный цифровой ресурс Руконт - межотраслевая электронная библиотека (ЭБС) на базе технологии Контекстум (всего произведений: 634620)
Контекстум
.
Клиническая лабораторная диагностика  / №2 2017

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ РЕАКЦИИ МИНИСЕКВЕНИРОВАНИЯ С MALDI-TOF МАСССПЕКТРОМЕТРИЧЕСКОЙ ДЕТЕКЦИЕЙ ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ ГЕНЕТИЧЕСКИ ИЗМЕНЕННЫХ ВАРИАНТОВ ВОЗБУДИТЕЛЯ ХОЛЕРЫ (250,00 руб.)

0   0
Первый авторХунхеева
АвторыМиронова Л.В., Балахонов С.В., Афанасьев М.В.
Страниц5
ID576924
АннотацияДля детекции генетически измененных вариантов V. cholerae eltor, характеризующихся наличием однонуклеотидных полиморфизмов в гене ctxB, предложен метод минисеквенирования с MALDI-ToF масс-спектрометрическим анализом продуктов реакции с подобранными зондами, прилегающими к 115 и 203 позициям указанного ранее гена. При масс-спектрометрическом анализе результатов реакции минисеквенирования штаммов V. cholerae eltor, изолированных при эпидемических осложнениях на территории Сибири и Дальнего Востока, выявлены масс-спектры, соответствующие значениям молекулярных масс зондов (ctxB115, ctxB203) и достроившихся комплементарно к точкам соответствующих замен (T/C) дидезоксинуклеотидов (ddTTP, ddCTP). Для исследуемых штаммов V. cholerae eltor, изолированных в 70-х годах XX столетия установлена элонгация обоих зондов дидезокситимидином, что свидетельствует о присутствии в их геноме характерной для типичных представителей V. cholerae eltor ctxB3 аллели с тимином в 115 и 203 позициях. Для V. cholerae eltor, изолированных в 90-х годах, установлен отжиг к точкам замен дидезоксицитозина и наличие ctxB1 аллели с цитозином в анализируемых позициях, характерной для вибриона классического биовара, и обнаруживаемая в геноме одного из вариантов атипичных генетически измененных клонов V. cholerae eltor. По чувствительности и специфичности метод не уступает прямому секвенированию гена ctxB штаммов V. cholerae eltor и оказывается перспективным для анализа других значимых однонуклеотидных полиморфизмов
УДК579.843.1:579.253.4.083.1
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ РЕАКЦИИ МИНИСЕКВЕНИРОВАНИЯ С MALDI-TOF МАСССПЕКТРОМЕТРИЧЕСКОЙ ДЕТЕКЦИЕЙ ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ ГЕНЕТИЧЕСКИ ИЗМЕНЕННЫХ ВАРИАНТОВ ВОЗБУДИТЕЛЯ ХОЛЕРЫ / Ж.Ю. Хунхеева [и др.] // Клиническая лабораторная диагностика .— 2017 .— №2 .— С. 54-58 .— URL: https://rucont.ru/efd/576924 (дата обращения: 19.04.2024)

Предпросмотр (выдержки из произведения)

2 ИСПОЛЬЗОВАНИЕ РЕАКЦИИ МИНИСЕКВЕНИРОВАНИЯ С MALDI-TOF МАСССПЕКТРОМЕТРИЧЕСКОЙ ДЕТЕКЦИЕЙ ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ ГЕНЕТИЧЕСКИ ИЗМЕНЕННЫХ ВАРИАНТОВ ВОЗБУДИТЕЛЯ ХОЛЕРЫ 1 Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Роспотребнадзора, 664047, Иркутск; 2Иркутский областной клинический консультативно-диагностический центр, 664022, Иркутск, Российская Федерация Для детекции генетически измененных вариантов V. cholerae eltor, характеризующихся наличием однонуклеотидных полиморфизмов в гене ctxB, предложен метод минисеквенирования с MALDI-ToF масс-спектрометрическим анализом продуктов реакции с подобранными зондами, прилегающими к 115 и 203 позициям указанного ранее гена. <...> При масс-спектрометрическом анализе результатов реакции минисеквенирования штаммов V. cholerae eltor, изолированных при эпидемических осложнениях на территории Сибири и Дальнего Востока, выявлены масс-спектры, соответствующие значениям молекулярных масс зондов (ctxB115, ctxB203) и достроившихся комплементарно к точкам соответствующих замен (T/C) дидезоксинуклеотидов (ddTTP, ddCTP). <...> Для V. cholerae eltor, изолированных в 90-х годах, установлен отжиг к точкам замен дидезоксицитозина и наличие ctxB1 аллели с цитозином в анализируемых позициях, характерной для вибриона классического биовара, и обнаруживаемая в геноме одного из вариантов атипичных генетически измененных клонов V. cholerae eltor. <...> Использование реакции минисеквенирования с Maldi-ToF масс-спектрометрической детекцией для обнаружения генетически измененных вариантов возбудителя холеры. <...> 2017; 62 (2):116-120 DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0869-2084-2017-62-2-116-120 Для корреспонденции: Хунхеева Жанна Юрьевна, врач-бактериолог лаб. холеры Иркутского научно-исследовательского противочумного института Роспотребнадзора, e-mail: Khunkheeva2015@yandex.ru Khunkheeva J.Yu. <...> 2 The applicaTion of maldi-Tof mini-seQuencing for deTecTing geneTically alTered versions of cholera agenT 1 The Irkutskii research anti-plague institute of the Rospotrebnadzor, 664047 Irkutsk, Russia 2The Irkutskii oblastnoii clinical consultative diagnostic center, 664022 Irkutsk, Russia The genetically altered modifications of V.cholerae eltor are characterized by <...>