ПОЛУЧЕНИЕ РЕКОМБИНАНТНОЙ ФОРМЫ БЕЛКА (680,00 руб.)

Первый автор	Воробьев
Авторы	Сидоров А.В., Калошин А.А., Михайлова Н.А., Поддубиков А.В., Грубер И.М.
Страниц	5

ID	813358
Аннотация	Получена рекомбинантная форма белка пневмолизина Streptococcus pneumoniae. С помощью программы для биоинформационного анализа Vector NTI Advance ver. 11.0 были сконструированы праймеры для проведения ПЦР с целью дальнейшего клонирования фрагмента генома штамма № 3358 S. pneumoniae серотипа 19F, содержащего нуклеотидную последовательность, кодирующую полноразмерный белок пневмолизин. Получен ПЦР-продукт с молекулярной массой, соответствующей нуклеотидной последовательности фрагмента генома S. pneumoniae, кодирующего полноразмерный белок пневмолизин. Была сконструирована система для экспрессии рекомбинантного белка пневмолизина в бактериальной культуре E. coli. Идентичность встроенной нуклеотидной последовательности, кодирующей полноразмерный рекомбинантный белок пневмолизин, синтезируемый в штамме М15 E. coli, была подтверждена секвенированием. Очистку рекомбинантного белка проводили методом аффинной хроматографии с использованием Ni-сефарозы в 8 M буферном растворе мочевины. Подтверждение рекомбинантного белка проводили с помощью моноклональных антител к пневмолизину в иммуноблоттинге.

ПОЛУЧЕНИЕ РЕКОМБИНАНТНОЙ ФОРМЫ БЕЛКА / Д.С. Воробьев [и др.] // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины .— 2022 .— №12 .— С. 723-727 .— URL: https://rucont.ru/efd/813358 (дата обращения: 26.04.2024)