173–187 УДК 577.322.24+577.322.72 ПРОТЕОМНЫЙ АНАЛИЗ ПРИМЕСЕЙ В РЕКОМБИНАНТНЫХ МЕМБРАННЫХ ГЕМОПРОТЕИНАХ, ЭКСПРЕССИРОВАННЫХ В E. coli И ВЫДЕЛЕННЫХ C ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ МЕТАЛЛО-АФФИННОЙ ХРОМАТОГРАФИИ © 2017 г. А. В. Янцевич, Я. В. Диченко, А. В. Иванчик, М. А. Шапиро, М. Травкина <...> , Т. В. Шкель, А. А. Гилеп, Г. В. Сергеев, С. А. Усанов Институт биоорганической химии НАН Беларуси, Минск 220141 e-mail: yantsevich@iboch.bas-net.by Поступила в редакцию 15.09.2016 г. В 14 препаратах рекомбинантных мембранных гемо- и флавопротеинов человека, экспрессированных в Escherichia coli и очищенных металл-хелатной аффинной хроматографией, “shot-gun” протеомным анализом идентифицированы примесные белки бактериальной клетки. <...> Во многих препаратах присутствовал фактор элонгации Tu 2, характеризующийся большим дипольным моментом и кластерным расположением кислых аминокислотных остатков, которые обеспечивают специфическое взаимодействие с сорбентом. <...> Пептидил-пролил цис-транс изомераза SlyD, глутамин-фруктоза6-фосфат аминотрансфераза и каталаза HPII, содержащие повторяющиеся последовательности HxH, QxQ и RxR и способные специфически взаимодействовать с сорбентом, также были обнаружены в составе примесных белков. <...> Результаты анализа указывают на то, что состав примесей может изменяться в зависимости от природы экспрессируемого белка, что связано с реакцией протеома клетки E. coli на экспрессию чужеродного белка. <...> Сделано заключение, что при наличии информации об аминокислотных последовательностях белков протеома клетки, в которой экспрессировался рекомбинантный белок, можно прогнозировать природу белковых примесей, присутствующих в нем после очистки методом металл-хелатной аффинной хроматографии на различных сорбентах. <...> Ключевые слова: гемопротеин, рекомбинантный белок, шаперонин, протеомика, масс-спектрометрия, металл-хелатная аффинная хроматография DOI: 10.7868/S0555109917020179 Аффинная хроматография относится к одному из основных и наиболее эффективных методов очистки рекомбинантных <...>