ВЫСОКИЙ УРОВЕНЬ ЭКСПРЕССИИ И АТФАЗНАЯ АКТИВНОСТЬ РЕКОМБИНАНТНОГО РАСТВОРИМОГО БЕЛКА ТЕПЛОВОГО ШОКА GRP78 ЧЕЛОВЕКА (200,00 руб.)

301 – 308 УДК 577.112 ВЫСОКИЙ УРОВЕНЬ ЭКСПРЕССИИ И АТФазная АКТИВНОСТЬ РЕКОМБИНАНТНОГО РАСТВОРИМОГО БЕЛКА ТЕПЛОВОГО ШОКА GRP78 ЧЕЛОВЕКА* © 2017 У Шуан1,2#, Чжан Хунпэн1,2#, Ло Мяо3#, Чень Кэ1, Ян Вэй2, Бай Лэй1, Хуан Айлун1, Ван Дэцян1,2** 1 Chongqing Medical University, Key Laboratory of Molecular Biology on Infectious Disease, YiXueYuanlu1, 400016 Chongqing, People’s Republic of China; Email: wangdq@cqmu.edu.cn 2 Chongqing Medical University, Department of Laboratory Medicine, YiXueYuanlu1, 400016 Chongqing, People’s Republic of China 3 People’s Hospital of YuBei District, Department of Laboratory Medicine, No. <...> 61 JIANSHE Road, YuBei District, 401120 Chongqing, People’s Republic of China Поступила в редакцию 17.05.16 После доработки 29.09.16 Обнаружено, что белок теплового шока GRP78 стимулирует рост опухолей, поэтому он может рассматри ваться в качестве новой мишени для действия противораковых лекарств. <...> Актуальным остается вопрос о по лучении больших количеств полноцепочечного рекомбинантного белка GRP78. <...> В данной работе показано, что этот рекомбинантный белок GRP78 можно получать в значительных количествах в активном состоянии путем аутоиндукции клеток E. coli. <...> С помощью метода гельфильтрации показано, что полученный шапероновый белок находится в мономерном состоянии. <...> Очищенный белок GRP78 человека катализирует превращение АТФ в АДФ и не требует ионов металлов в качестве кофакторов. <...> Три мутантные формы белка, содержащие еди ничные аминокислотные замены, а именно T38A, T229A и S300A, демонстрировали меньшую АТФазную активность по сравнению с белком дикого типа, что указывает на локализацию активного центра АТФазы в отрицательно заряженной полости белка. <...> Замены аминокислотных остатков в отрицательно заряженной полости, приводящие к значительному снижению активности фермента, указывают на их важную роль в ферментативной активности. <...> Белок GRP78 человека (также известный как BiP) состоит из 654 аминокислотных остатков (а.о.), образующих три структурных домена: 1) Nконцевой, демонстрирующий АТФазную активность <...>