3–8 МЕТОДЫ УДК 577.214.32 ОЧИСТКА ДНК-БЕЛКОВЫХ КОМПЛЕКСОВ С ПОМОЩЬЮ НАТИВНОГО ГЕЛЬ-ЭЛЕКТРОФОРЕЗА ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ В ЭЛЕКТРОННОМ МИКРОСКОПЕ М.Е. <...> Соколова1,* 1 Кафедра биоинженерии, биологический факультет, Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова; Россия, 119234, г. Москва, Ленинские горы, д. <...> 12; 2 кафедра биохимии, Московский государственный медико-стоматологический университет имени А.И. Евдокимова; Россия, 127473, г. Москва, ул. <...> 1 *e-mail: sokolova@mail.bio.msu.ru Электрофоретическое разделение в нативных условиях может быть использовано для очистки белковых молекул, а также их комплексов с ДНК и другими лигандами. <...> Показана принципиальная возможность специфического выделения комплексов ДНК с белком размером около 200 кДа из нативного геля в препаративных количествах для изучения с помощью электронной микроскопии. <...> Получены двумерные проекционные структуры нуклеосом с разрешением 25 Е. <...> Проведено сравнение электронно-микроскопических изображений нуклеосом до и после выделения из нативного полиакриламидного геля. <...> Выявлено, что ориентация нуклеосом на углеродной подложке до и после электрофоретического разделения различна. <...> Ядерная ДНК клеток эукариот находится в комплексе с гистоновыми и негистоновыми белками, образуя хроматин. <...> В регуляции этих процессов существенную роль играет структура хроматина, которая зависит от конформационных изменений гистонов, а также хроматин-ремоделирующих факторов [1, 2], обеспечивающих доступность тех или иных участков ДНК для ферментов. <...> Основной структурной единицей хроматина является нуклеосома, состоящая из фрагмента ДНК длиной 146 пар нуклеотидов, образующего 1,75 витка, накрученного на октамер гистонов Н2А, Н2В, Н3 и Н4. <...> Гистоновый октамер состоит из центрального тетрамера (Н3-Н4)2, окруженного двумя димерами Н2А/Н2В. <...> Пространственная структура нуклеосомы напоминает шайбу или плоский цилиндр диаметром 11 нм и высотой 5,7 нм [3, 4]. <...> Структурная целостность октамерного <...>