Был определен участок, высоко специфический для T. pallidum и, в пределах данного участка выбраны последовательности для праймеров и гибридизационного зонда. <...> Выбранная область нуклеотидной последовательности 16S рРНК T. pallidum комплементарная зонду содержит не менее 8 отличий от гомологичных последовательностей других ближайших представителей вида T. pallidum, что обеспечивает высокую аналитическую специфичность разрабатываемой методики. <...> Последовательность прямого праймера была идентична последовательности мишени, а последовательность обратного праймера, кроме последовательности комплементарной мишени, на 5` конце содержала последовательность промотора полимеразы Т7 РНК. <...> Предел обнаружения разработанной методики был исследован на рекомбинантном препарате фага лямбда gt10 с клонированной последовательностью ДНК T. pallidum и последовательностью промотора полимеразы Т7 РНК. <...> При добавлении такого препарата в реакцию НАСБА, Т7 РНКполимераза взаимодействует с последовательностью промотора и запускает процесс образования молекул РНК. <...> Установленный предел обнаружения составил 20 копий 16S рРНК T. pallidum в реакцию, или 4Ч103 копий в мл, что с учетом содержания рРНК в клетке T. pallidum, обеспечивает выявление единичных микроорганизмов в исследуемом образце. <...> Указанный предел обнаружения разработанной методики значительно превышает установленный ранее предел обнаружения для ТПМ – 105 клеток в мл и обеспечивает более высокую диагностическую чувствительность. <...> И.М. Сеченова, Москва Выявление и определение возбудителей с помощью молекулярно-генетических методов, в первую очередь ПЦР, имеют важное значение в лабораторной практике благодаря главному преимуществу – высокой чувствительности. <...> Выделение ДНК из материала является важным этапом в ПЦРдиагностике, особенно в случаях низкой паразитемии. <...> Нами было проведено сравнительное изучение наборов для выделения ДНК разных производителей. <...> Для этого были приготовлены <...>