14 БИОХИМИЯ УДК 577.112 ОСОБЕННОСТИ РЕГУЛЯЦИИ АКТИВНОСТИ ГЛЮКОКИНАЗЫ ПЕЧЕНИ КРЫСЫ Л.Я. <...> Ху, Н.Ю. Гончарова, А.М. Рубцов (кафедра биохимии; e-mail: am_rubtsov@mail.ru) Предложен простой метод выделения глюкокиназы из растворимой фракции печени крысы, позволяющий получать препарат с высокой удельной активностью с сохранением нативных кинетических свойств фермента, практически лишенный примеси других молекулярных форм гексокиназы. <...> Обсуждается роль кинетического механизма реакции в регуляции активности глюкокиназы в печени. <...> Глюкокиназа (АТР:D-глюкоза-6-фосфотрансфераза, КФ 2.7.1.1, ГЛК) является одной из молекулярных форм гексокиназы (ГК) млекопитающих [1]. <...> По современным представлениям [1—5], ГЛК поджелудочной железы играет роль глюкозного сенсора, стимулирующего секрецию инсулина при гипергликемии, а ГЛК печени участвует в быстром удаление избытка глюкозы (Glc) из крови. <...> На долю ГЛК в печени приходится около 80% от общей активности всех молекулярных форм ГК [4—7], причем именно ГЛК обеспечивает быстрый синтез гликогена и его депонирование в печени при гипергликемии [5, 8]. <...> С физиологической точки зрения особый интерес представляет механизм срочной активации ГЛК, связанный со специфическим кинетическим поведением фермента [9]. <...> В отличие от других молекулярных форм гексокиназы ГЛК демонстрирует положительную кооперативность при взаимодействии с Glc в области ее физиологических концентраций [6, 7, 10—12]. <...> Степень кооперативности при взаимодействии ГЛК с субстратом характеризуется величиной коэффициента Хилла (h) 1,5—2 [4, 9, 11—13]. <...> Эта кооперативность не связана с наличием двух центров связывания Glc на молекуле фермента [1] или с его олигомерной организацией, так как ГЛК, как и другие изоформы гексокиназы, является мономерным белком [1, 14], причем олигомеризации ГЛК в ходе реакции также не наблюдается [15]. <...> В настоящее время кооперативный характер взаимодействия ГЛК с субстратом объясняется медленной конформационной перестройкой <...>