ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОЦЕНКА СПОСОБНОСТИ Cdk5 ФОСФОРИЛИРОВАТЬ ДЕУБИКВИТИНИРУЮЩИЙ ФЕРМЕНТ BRCC3 IN VITRO (680,00 руб.)

Первый автор	Zhang
Авторы	Tian S.L., Xu S.Y., Shao X.Y.
Страниц	9

ID	780831
Аннотация	При болезни Паркинсона повышены как экспрессия деубиквитинирующего фермента BRCC3 (BRCA1-BRCA2-содержащая комплексная субъединица), так и уровень Cdk5 (циклинзависимая протеинкиназа 5), участвующие в нейровоспалительном ответе. Регуляторный механизм Cdk5 в посттрансляционной модификации BRCC3 остаётся неясным. В данном исследовании выясняли, способна ли Cdk5 фосфорилировать BRCC3. Сайты фосфорилирования BRCC3 киназой Cdk5 были предсказаны с помощью программы GPS 5.0. Плазмиду His-BRCC3 конструировали путём клонирования гена BRCC3 в вектор pGEX-6P-1, после чего продукцию рекомбинантного белка His-BRCC3 индуцировали изопро пил-β- D-1-тиогалактопиранозидом. Белок His-BRCC3 выделяли с помощью аффинной хроматографии на His-Tag агарозе. Его сайты фосфорилирования также определяли с помощью программы GPS 5.0. Фосфорилирование рекомбинантного белка His-BRCC3 киназой Cdk5 in vitro детектировали масс-спектрометрией и вестерн-блоттингом. Показано, что Cdk5 может фосфорилировать деубиквитинирующий фермент BRCC3 in vitro, что может оказаться полезным для дальнейшего изучения механизма нейродегенерации.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОЦЕНКА СПОСОБНОСТИ Cdk5 ФОСФОРИЛИРОВАТЬ ДЕУБИКВИТИНИРУЮЩИЙ ФЕРМЕНТ BRCC3 IN VITRO / C.H. Zhang [и др.] // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины .— 2021 .— №12 .— С. 698-706 .— URL: https://rucont.ru/efd/780831 (дата обращения: 04.05.2024)