ВЛИЯНИЕ ИНТРАОВАРИАЛЬНОЙ ВИТРИФИКАЦИИ НА ПОКАЗАТЕЛИ КРИОРЕЗИСТЕНТНОСТИ ООЦИТ-КУМУЛЮСНЫХ КОМПЛЕКСОВ СВИНЕЙ (80,00 руб.)

Первый автор	Станиславович Т. И.
Авторы	Кузьмина Т. И., Молчанов А. В.
Страниц	6

ID	713043
Аннотация	Криоконсервация фрагментов яичников имеет много преимуществ по сравнению с замораживанием ооцитов или эмбрионов для сохранения генофонда редких и аборигенных популяций. Целые яичники труднее сохранить из-за их плотной структуры ткани, разветвленной сосудистой системы и разнообразия типов клеток [Макаревич А. и др., 2017]. Данный метод постоянно совершенствуется и активно используется в мировой репродуктологии для создания банков донорских яйцеклеток. Появление методики консервации фрагментов яичников с последующим размораживанием и пункцией фолликулов для извлечения ооцит-кумулюсных комплексов (ОКК) становится важной возможностью получения потомства от животных postmortem. Оценка морфологических показателей (экспансия клеток кумулюса) и состояния ядерного хроматина ооцитов свиней после интраовариальной витрификации выявила целесообразность использования диметилглицеролата кремния (ДМГК) для витрификации гамет. Эффект зависел от времени экспозиции фрагментов яичника в криопротекторных растворах: КПА 1 - 7,5% этиленгликоль (ЭГ), 7,5% диметилсульфоксид (ДМСО), 65% фосфатно-солевой буфер (ФСБ), 20% фетальная бычья сыворотка (ФБС); КПА 2 - 20% ЭГ, 20% ДМСО, 60% ФСБ, 0,5 моль/л сахарозы). Фрагменты яичников (15мм х 20мм), обработанные КПА в течение 25 минут и 15 минут, или в течение 15 минут и 2 минут погружали в жидкий азот. Оттаивание проводили путем последовательной инкубации: 1 минута в 80% фосфатно-солевого буфере (ФСБ) с 20% фетальной бычьей сыворотки (ФБС), 0,5 моль/л сахарозы; 5 минут в 80% ФСБ с 0,25 моль/л сахарозы. В раствор для оттаивания опытных групп вводили 0,2% ДМГК. Хроматин ооцитов визуализировали Hoechst 33258. Обнаружено увеличение доли ооцитов с компактным кумулюсом при экспозициях:15 мин. и 2 мин.- 14% против 32%, P<0,01, χ2 –test и 25 мин. и 15 мин.- 21% против 53%, P<0,001, χ2 –test; и снижение доли дегенерированных ооцитов в обеих опытных группах при экспозициях:15 мин. и 2 мин. - 28% против 22%, P<0,05, χ2 -test; 25 мин. и 15 мин.- 40% против 6%, P<0,001, χ2–test). На основе сравнительного анализа показателей криорезистентности ооцит-кумулюсных комплексов (степень экспансии кумулюса, доля дегенерированных ооцитов) установлены временные параметры обработки фрагментов яичников криопротекторными агентами с ДМГК (последовательная экспозиция 25 мин. и 15 мин.), позволяющие повысить криотолерантность женских гамет. Полученные данные могут быть использованы при моделировании систем интраовариальной витрификации ооцитов свиней.

Станиславович, Т.И. ВЛИЯНИЕ ИНТРАОВАРИАЛЬНОЙ ВИТРИФИКАЦИИ НА ПОКАЗАТЕЛИ КРИОРЕЗИСТЕНТНОСТИ ООЦИТ-КУМУЛЮСНЫХ КОМПЛЕКСОВ СВИНЕЙ / Т.И. Станиславович, Т.И. Кузьмина, А.В. Молчанов // Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии .— 2019 .— №4 .— URL: https://rucont.ru/efd/713043 (дата обращения: 26.04.2024)