БЮЛЛЕТЕНЬ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ
БИОЛОГИИ И МЕДИЦИНЫ
2019 Том 168 № 10
СОДЕРЖАНИЕ
Физиология
Влияние протонов на ГАМКА
рецепторы центральных нейронов разного типа
Солнцева Е.И., Буканова Ю.В., Скребицкий В.Г. ........................................................................... 400
Общая патология и патологическая физиология
Цитокиновый профиль плазмы крови пациентов с болезнью Паркинсона,
ассоциированной с мутациями в гене GBA
Милюхина И.В., Усенко Т.С., Сенкевич К.А., Николаев М.А., Тимофеева А.А.,
Агапова Е.A., Семенов А.В., Любимова Н.Е., Тотолян А.А., Пчелина С.Н. ............................. 404
Характеристика двигательной активности сперматозоидов половозрелого
потомства самок крыс с экспериментальным сахарным диабетом 1го типа
Г.В.Брюхин, С.Д.Антонов .................................................................................................................... 408
Влияние естественного комплекса цитокинов на метаболизм гладкомышечных
клеток сосудов миокарда в норме и при увеличении гемодинамической нагрузки
Тверская М.С., Ганковская Л.В., Сухопарова В.В., Вирганский А.О., Горенков Р.В. .............. 411
Влияние пребиотического комплекса на состояние микробиоценоза кишечника
и эндотоксинемию у крыссамок с экспериментальной сердечной недостаточностью
Власов А.А., Шперлинг М.И., Тёркин Д.А., Быстрова О.В.,
Осипов Г.А., Саликова С.П., Гриневич В.Б. ...................................................................................... 416
Биофизика и биохимия
Участие свободнорадикальных процессов в структурнометаболических
нарушениях ткани лёгких в динамике воздействия угольнопородной
пыли и их адаптогенная коррекция
Жукова А.Г., Михайлова Н.Н., Сазонтова Т.Г., Жданова Н.Н.,
Казицкая А.С., Бугаева М.С., Горохова Л.Г., Архипенко Ю.В. .................................................... 420
Соли аммония способствуют функциональной адаптации эритроцитов
крысы в модели принудительного плавания
Новожилов А.В., Миндукшев И.В., Корф Е.А., Кривченко А.И., Гончаров Н.В........................ 425
Фармакология и токсикология
Психотропные эффекты производного пиразоло[C]пиридина ГИЖ72
связаны с функциональной активностью АТФзависимых калиевых каналов
Касабов К.А., Кудряшов Н.В., Волкова А.В., Шимширт А.А.,
Калинина Т.С., Жмуренко Л.А., Воронина Т.А................................................................................ 430
ОКТЯБРЬ
Стр.2
Антиэкссудативный эффект финастерида и нового производного
пиразоло[c]пиридина ГИЖ72 на модели уксусного перитонита
Кудряшов Н.В., Иванова Е.А., Калинина Т.С., Шимширт А.А.,
Куршин А.А., Жмуренко Л.А., Воронина Т.А.................................................................................... 435
Оценка влияния производных ГАМК на тревожное и компульсивное
поведение потомства крыс с экспериментальной преэклампсией
Музыко Е.А., Ткачева Г.А., Перфилова В.Н., Матвиенко Л.С.,
Науменко Л.В., Васильева О.С., Тюренков И.Н. ............................................................................. 439
Особенности фармакокинетики и биодоступность некоторых
сердечнососудистых препаратов в условиях антиортостатической гипокинезии
Поляков А.В., Свистунов А.А., Кондратенко С.Н.,
Ковачевич И.В., Репенкова Л.Г., Савельева М.И., Кукес В.Г. ..................................................... 449
Цитохимическая оценка токсического действия комбинированных
противотуберкулёзных препаратов на метаболический статус лимфоцитов крови
Долгушин М.В. ........................................................................................................................................ 454
ГК2 снижает гибель культивированных зернистых нейронов мозжечка,
вызванную токсическим действием ионов цинка
Стельмашук Е.В., Александрова О.П., Рогозин П.Д., Генрихс Е.Е., Новикова С.В.,
Гудашева Т.А., Шаронова И.Н., Скребицкий В.Г., Исаев Н.К. ..................................................... 458
Иммунология и микробиология
Участие мультипотентных стромальных клеток (МСК) костного мозга
в процессах, следствием которых может быть развитие кальцификации сосудов
Горская Ю.Ф., Семенова Е.Н., Нагурская Е.В., Нестеренко В.Г. ............................................... 464
Иммунизация рекомбинантным пневмолизином вызывает выработку
антител и защищает мышей в модели системной инфекции,
вызванной Streptococcus pneumoniae
Петухова Е.С., Воробьев Д.С., Сидоров А.В., Семенова И.Б.,
Волох Ю.В., Леонова А.Ю., Сидорова А.В., Михайлова Н.А. ....................................................... 471
Антибактериальные свойства супергидрофильной текстурированной
меди при контакте с бактериальными суспензиями
Емельяненко А.М., Каминский В.В., Пыцкий И.С., Домантовский А.Г.,
Емельяненко К.А., Алешкин А.В., Бойнович Л.Б. ........................................................................... 474
Генетика
Полиморфизм CYP3A генов и хроническая ртутная интоксикация
Черняк Ю.И., Меринова А.П. .............................................................................................................. 479
Вирусология
Изучение противовирусной активности метаболитов
нового штамма бактерии Serratia species K57
Пучкова Л.И., Андреева И.С., Мазуркова Н.А., Филиппова Е.И., Сафатов А.С. ................... 484
Стр.3
Онкология
Взаимосвязь уровней микроРНК с клеточным составом подмышечного
лимфатического узла при раке молочной железы у крыс Вистар
Кабаков А.В., Лыков А.П., Казаков О.В., Повещенко А.Ф., Повещенко О.В.,
Ким И.И., Бондаренко Н.А., Стрункин Д.Н., Летягин А.Ю., Коненков В.И. ........................... 488
Глиофибриллярный кислый белок в диагностике и прогнозе
злокачественных глиальных опухолей
Любимова Н.В., Тимофеев Ю.С., Митрофанов А.А.,
Бекяшев А.Х., Гончарова З.А., Кушлинский Н.Е. ............................................................................ 491
Биотехнологии
Гемосовместимость в опытах in vitro наночастиц серебра
на основе конъюгата кватернизированного хитозана с галловой кислотой
Дрозд Н.Н., Луньков А.П., Ильина А.В., Варламов В.П. ................................................................ 496
Морфология и патоморфология
Корреляционный анализ морфологических изменений
структурнофункциональных зон брыжеечных лимфатических узлов
с цитокинами лимфы грудного лимфатического протока
при экспериментальном раке молочной железы
Казаков О.В., Райтер Т.В., Повещенко А.Ф., Орлов Н.Б.,
Повещенко О.В., Кабаков А.В., Ким И.И., Бондаренко Н.А., Стрункин Д.Н.,
Лыков А.П., Летягин А.Ю., Коненков В.И. ...................................................................................... 501
Эритроидные предшественники из костного мозга крыс при комбинированном
действии ионизирующего излучения и антиортостатического вывешивания
Маркина Е.А., Штемберг А.С., Буравкова Л.Б. .............................................................................. 506
Морфометрические показатели неокортекса и гиппокампа, гепатоцитов,
эпителия языка и тонкой кишки крыс при введении пептида MGHPPGP
в посттравматический период
Флейшман М.Ю., Якушева Н.Ю., Малофей Ю.Б., Толстенок И.В., Иннокентьев А.А. ...... 510
Использование метода фокального фотоиндуцированного тромбоза
при моделировании ишемии спинного мозга
Пашин С.С., Кузнецов С.Л., Пашина Н.Р.,
Цомартова Д.А., Черешнева Е.В., Иванова М.Ю. ......................................................................... 515
Функциональный дисбаланс глутамат и ГАМКергической
нейрональных систем в патогенезе очаговой фармакорезистентной
эпилепсии у человека
Сажина Т.А., Ситовская Д.А., Забродская Ю.М., Бажанова Е.Д. ............................................ 519
Морфологическая и биохимическая характеристика гиперплазии
предстательной железы при введении сульпирида
Цветков И.С., Косырева А.М., Мхитаров В.А., Постовалова Е.А.,
Хочанский Д.Н., Макарова О.В., Бредова О.Ю., Остров В.Ф. ..................................................... 523
Стр.4
ISSN 03659615
Электронная версия
ISSN 24131008
БЮЛЛЕТЕНЬ
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ
БИОЛОГИИ
И МЕДИЦИНЫ
10
2019
Стр.5
БЮЛЛЕТЕНЬ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ
БИОЛОГИИ И МЕДИЦИНЫ
2019 Том 168 № 10
СОДЕРЖАНИЕ
Физиология
Влияние протонов на ГАМКА
рецепторы центральных нейронов разного типа
Солнцева Е.И., Буканова Ю.В., Скребицкий В.Г. ........................................................................... 400
Общая патология и патологическая физиология
Цитокиновый профиль плазмы крови пациентов с болезнью Паркинсона,
ассоциированной с мутациями в гене GBA
Милюхина И.В., Усенко Т.С., Сенкевич К.А., Николаев М.А., Тимофеева А.А.,
Агапова Е.A., Семенов А.В., Любимова Н.Е., Тотолян А.А., Пчелина С.Н. ............................. 404
Характеристика двигательной активности сперматозоидов половозрелого
потомства самок крыс с экспериментальным сахарным диабетом 1го типа
Г.В.Брюхин, С.Д.Антонов .................................................................................................................... 408
Влияние естественного комплекса цитокинов на метаболизм гладкомышечных
клеток сосудов миокарда в норме и при увеличении гемодинамической нагрузки
Тверская М.С., Ганковская Л.В., Сухопарова В.В., Вирганский А.О., Горенков Р.В. .............. 411
Влияние пребиотического комплекса на состояние микробиоценоза кишечника
и эндотоксинемию у крыссамок с экспериментальной сердечной недостаточностью
Власов А.А., Шперлинг М.И., Тёркин Д.А., Быстрова О.В.,
Осипов Г.А., Саликова С.П., Гриневич В.Б. ...................................................................................... 416
Биофизика и биохимия
Участие свободнорадикальных процессов в структурнометаболических
нарушениях ткани лёгких в динамике воздействия угольнопородной
пыли и их адаптогенная коррекция
Жукова А.Г., Михайлова Н.Н., Сазонтова Т.Г., Жданова Н.Н.,
Казицкая А.С., Бугаева М.С., Горохова Л.Г., Архипенко Ю.В. .................................................... 420
Соли аммония способствуют функциональной адаптации эритроцитов
крысы в модели принудительного плавания
Новожилов А.В., Миндукшев И.В., Корф Е.А., Кривченко А.И., Гончаров Н.В........................ 425
Фармакология и токсикология
Психотропные эффекты производного пиразоло[C]пиридина ГИЖ72
связаны с функциональной активностью АТФзависимых калиевых каналов
Касабов К.А., Кудряшов Н.В., Волкова А.В., Шимширт А.А.,
Калинина Т.С., Жмуренко Л.А., Воронина Т.А................................................................................ 430
ОКТЯБРЬ
Стр.6
Антиэкссудативный эффект финастерида и нового производного
пиразоло[c]пиридина ГИЖ72 на модели уксусного перитонита
Кудряшов Н.В., Иванова Е.А., Калинина Т.С., Шимширт А.А.,
Куршин А.А., Жмуренко Л.А., Воронина Т.А.................................................................................... 435
Оценка влияния производных ГАМК на тревожное и компульсивное
поведение потомства крыс с экспериментальной преэклампсией
Музыко Е.А., Ткачева Г.А., Перфилова В.Н., Матвиенко Л.С.,
Науменко Л.В., Васильева О.С., Тюренков И.Н. ............................................................................. 439
Особенности фармакокинетики и биодоступность некоторых
сердечнососудистых препаратов в условиях антиортостатической гипокинезии
Поляков А.В., Свистунов А.А., Кондратенко С.Н.,
Ковачевич И.В., Репенкова Л.Г., Савельева М.И., Кукес В.Г. ..................................................... 449
Цитохимическая оценка токсического действия комбинированных
противотуберкулёзных препаратов на метаболический статус лимфоцитов крови
Долгушин М.В. ........................................................................................................................................ 454
ГК2 снижает гибель культивированных зернистых нейронов мозжечка,
вызванную токсическим действием ионов цинка
Стельмашук Е.В., Александрова О.П., Рогозин П.Д., Генрихс Е.Е., Новикова С.В.,
Гудашева Т.А., Шаронова И.Н., Скребицкий В.Г., Исаев Н.К. ..................................................... 458
Иммунология и микробиология
Участие мультипотентных стромальных клеток (МСК) костного мозга
в процессах, следствием которых может быть развитие кальцификации сосудов
Горская Ю.Ф., Семенова Е.Н., Нагурская Е.В., Нестеренко В.Г. ............................................... 464
Иммунизация рекомбинантным пневмолизином вызывает выработку
антител и защищает мышей в модели системной инфекции,
вызванной Streptococcus pneumoniae
Петухова Е.С., Воробьев Д.С., Сидоров А.В., Семенова И.Б.,
Волох Ю.В., Леонова А.Ю., Сидорова А.В., Михайлова Н.А. ....................................................... 471
Антибактериальные свойства супергидрофильной текстурированной
меди при контакте с бактериальными суспензиями
Емельяненко А.М., Каминский В.В., Пыцкий И.С., Домантовский А.Г.,
Емельяненко К.А., Алешкин А.В., Бойнович Л.Б. ........................................................................... 474
Генетика
Полиморфизм CYP3A генов и хроническая ртутная интоксикация
Черняк Ю.И., Меринова А.П. .............................................................................................................. 479
Вирусология
Изучение противовирусной активности метаболитов
нового штамма бактерии Serratia species K57
Пучкова Л.И., Андреева И.С., Мазуркова Н.А., Филиппова Е.И., Сафатов А.С. ................... 484
Стр.7
Онкология
Взаимосвязь уровней микроРНК с клеточным составом подмышечного
лимфатического узла при раке молочной железы у крыс Вистар
Кабаков А.В., Лыков А.П., Казаков О.В., Повещенко А.Ф., Повещенко О.В.,
Ким И.И., Бондаренко Н.А., Стрункин Д.Н., Летягин А.Ю., Коненков В.И. ........................... 488
Глиофибриллярный кислый белок в диагностике и прогнозе
злокачественных глиальных опухолей
Любимова Н.В., Тимофеев Ю.С., Митрофанов А.А.,
Бекяшев А.Х., Гончарова З.А., Кушлинский Н.Е. ............................................................................ 491
Биотехнологии
Гемосовместимость в опытах in vitro наночастиц серебра
на основе конъюгата кватернизированного хитозана с галловой кислотой
Дрозд Н.Н., Луньков А.П., Ильина А.В., Варламов В.П. ................................................................ 496
Морфология и патоморфология
Корреляционный анализ морфологических изменений
структурнофункциональных зон брыжеечных лимфатических узлов
с цитокинами лимфы грудного лимфатического протока
при экспериментальном раке молочной железы
Казаков О.В., Райтер Т.В., Повещенко А.Ф., Орлов Н.Б.,
Повещенко О.В., Кабаков А.В., Ким И.И., Бондаренко Н.А., Стрункин Д.Н.,
Лыков А.П., Летягин А.Ю., Коненков В.И. ...................................................................................... 501
Эритроидные предшественники из костного мозга крыс при комбинированном
действии ионизирующего излучения и антиортостатического вывешивания
Маркина Е.А., Штемберг А.С., Буравкова Л.Б. .............................................................................. 506
Морфометрические показатели неокортекса и гиппокампа, гепатоцитов,
эпителия языка и тонкой кишки крыс при введении пептида MGHPPGP
в посттравматический период
Флейшман М.Ю., Якушева Н.Ю., Малофей Ю.Б., Толстенок И.В., Иннокентьев А.А. ...... 510
Использование метода фокального фотоиндуцированного тромбоза
при моделировании ишемии спинного мозга
Пашин С.С., Кузнецов С.Л., Пашина Н.Р.,
Цомартова Д.А., Черешнева Е.В., Иванова М.Ю. ......................................................................... 515
Функциональный дисбаланс глутамат и ГАМКергической
нейрональных систем в патогенезе очаговой фармакорезистентной
эпилепсии у человека
Сажина Т.А., Ситовская Д.А., Забродская Ю.М., Бажанова Е.Д. ............................................ 519
Морфологическая и биохимическая характеристика гиперплазии
предстательной железы при введении сульпирида
Цветков И.С., Косырева А.М., Мхитаров В.А., Постовалова Е.А.,
Хочанский Д.Н., Макарова О.В., Бредова О.Ю., Остров В.Ф. ..................................................... 523
Стр.8
400
Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2019, Том 168, № 10
ФИЗИОЛОГИЯ
ВЛИЯНИЕ ПРОТОНОВ НА ГАМКА
РЕЦЕПТОРЫ
ЦЕНТРАЛЬНЫХ НЕЙРОНОВ РАЗНОГО ТИПА
Е.И.Солнцева, Ю.В.Буканова, В.Г.Скребицкий
ФГБНУ Научный центр неврологии, Москва, РФ
Методом пэтчкламп регистрировали хлорный ток (IГАМК
), вызванный быстрой (600 мс)
аппликацией ГАМК на изолированные пирамидные нейроны гиппокампа и клетки Пур
кинье мозжечка крысы. Уровень рН раствора ГАМК в апплицирующей пипетке был
нейтральным (рН 7.4) или кислым (рН 7.0 или 6.0). Обнаружено, что аппликация протонов
на нейрон вызывает быстрое обратимое и дозозависимое снижение амплитуды IГАМК
.
Эффект на нейронах гиппокампа был достоверно сильнее, чем на клетках Пуркинье
мозжечка. Известно, что клетки Пуркинье содержат в основном синаптические ГАМКА
марного IГАМК
рецепторы, а пирамидные нейроны гиппокампа — как синаптические, так и экстрасинап
тические ГАМКА
экстрасинаптический компонент IГАМК
IГАМК
рецепторы, чем синаптические.
Ключевые слова: ГАМКрецептор, протоны, гиппокамп, мозжечок, габазин
ГАМК является ключевым тормозным нейроме
диатором, активирующим специфические рецеп
торы А и В типа [4]. ГАМКА
рецепторы являются
ионотропными и содержат анионный канал, через
который хлорным током обеспечивается гиперпо
ляризация мембраны и торможение импульсации.
ГАМКА
рецепторов [10]. Субъединич
рецепторы образованы 5 субъединицами.
Описано большое количество белков, образующих
субъединицы ГАМКА
рецепторы различаются [12]. Для
. Сделан вывод о том, что кислый рН сильнее угнетает экстрасинаптические ГАМКА
рецепторы. Мы выделяли экстрасинаптический компонент из сум
нейронов гиппокампа с помощью 50 нМ габазина. Нами обнаружено, что
сильнее блокируется протонами, чем суммарный
ких условиях, так и при развитии патологических
процессов (воспаление, ишемия, болевой синдром).
Показано, что состав ГАМКА
рецепторов клеток
Пуркинье является однородным и характеризует
ся присутствием в основном синаптических рецеп
торов [6]. В то же время в пирамидных нейронах
гиппокампа описано наличие как синаптических,
так и экстрасинаптических ГАМКА
рецепторов [2].
ный состав и фармакологические свойства синап
тических (фазических) и экстрасинаптических (то
нических) ГАМКА
Выделение экстрасинаптического компонента
ГАМКА
синаптических ГАМКАрецепторов характерно со
держание α13β23γ2субъединиц в соотношении
2:2:1, в то время как экстрасинаптические рецеп
торы могут содержать α4, α5, α6 и δсубъединицы
[3,12].
Влияние кислой среды на нейрональные ре
цепторы является актуальным вопросом нейрофи
зиологии, поскольку изменения внеклеточного рН
регистрируются как в нормальных физиологичес
Адрес для корреспонденции: synaptology@mail.ru. Солнце
ва Е.И.
базина [2,11]. Влиянию протонов на ГАМКА
рецепторов га
рецеп
тока в этих нейронах возможно с помощью
фармакологических инструментов, в частности
антагониста синаптических ГАМКА
торы уделено большое внимание, в том числе и на
ГАМКА
ток гранулярных клеток мозжечка [7] и ней
ронов гиппокампа [13]. Вместе с тем до сих пор от
сутствуют сведения о влиянии протонов на ГАМКА
ответа пирамидных ней
ронов гиппокампа.
рецепторы клеток Пуркинье мозжечка и на отдель
ные компоненты ГАМКА
Цель нашего исследования — изучить влия
ние протонов на хлорный ток, индуцированный ак
тивацией ГАМКА
рецепторов с разным субъеди
ничным составом, клеток Пуркинье мозжечка и пи
рамидных нейронов гиппокампа крысы.
Стр.9
ФИЗИОЛОГИЯ
401
МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Работа выполнена на изолированных пирамидных
нейронах области СА3 гиппокампа и изолированных
клетках Пуркинье мозжечка 1114дневных крыс
Вистар. ГАМК апплицировали на нейрон в концен
трации 5 мкМ через стеклянную пипетку диаметром
0.1 мм при её быстром латеральном смещении. Дли
тельность аппликации составляла 600 мс, интер
валы между аппликациями — 3040 с. Трансмем
бранные токи регистрировали методом пэтчкламп
(patchclamp) в конфигурации “целая клетка” [1].
Удерживаемый потенциал 70 мВ. Раствор в ре
гистрирующей пипетке содержал 40 мМ CsF,
100 мМ CsCl, 5 мМ ЭГТА, 4 мМ MgCl2, 4 мМ NaATФ,
5 мМ HEPES, 6 мМ ATФ pH 7.3. Внеклеточный
проточный раствор содержал 140 мМ NaCl, 3 мМ
KCl, 3 мМ CaCl2, 3 мМ MgCl2, 10 мМ Dглюкозы,
10 мМ HEPES hemisodium pH 7.4. Для блокады про
тонактивируемого ионного тока в раствор добав
ляли амилорид в концентрации 100 мкМ [6]. Ско
рость протока была 0.6 мл/мин. Все реактивы про
изводства Sigma.
Полученные данные статистически обрабаты
вали в программе Prism (GraphPad) с использова
нием теста ANOVA и непарного t критерия Стью
дента. Достоверными считали значения при p<0.05.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Короткая аппликация ГАМК на изолированные пи
рамидные нейроны гиппокампа или клетки Пуркинье
мозжечка крысы вызывала хлорный ток (IГАМК
), ам
плитуда которого зависела от концентрации ГАМК
(ЕС50
=8±3 мкМ). При изучении влияния протонов
мы столкнулись с проблемой суммации IГАМК
с током, текущим по протончувствительным ионным
на IГАМК
каналам (ASICs). В наших экспериментах короткая
аппликация кислого (рН 6.0) физиологического
раствора на изолированный нейрон гиппокампа или
Рис. 1. Влияние протонов на хлорный ток, вызванный аппликацией 5 мкМ ГАМК (IГАМК
ГАМК — 600 мс. б — средние значения пиковой амплитуды IГАМК
) на нейроны крысы.
Удерживаемый потенциал 70 мВ.
а — записи IГАМК
нейроны гиппокампа.
на пирамидных нейронах гиппокампа и клетках Пуркинье мозжечка. Длительность аппликации
при разных значениях рН, полученные на нейронах
гиппокампа (1) и нейронах мозжечка (2). в — концентрационная зависимость влияния протонов на пиковую
амплитуду IГАМК
нейронов гиппокампа (1) и мозжечка (2). ***p<0.001 по сравнению с влиянием протонов на
Стр.10