3, № 2 МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ СУБКУЛЬТУР BACILLUS ANTHRACIS, ВЫДЕЛЕННЫХ РАЗНЫМИ МЕТОДАМИ Е.В. <...> Кравец, З.Ф. Дугаржапова, Т.А. Иванова, В.Е. Такайшвили, С.В. Балахонов ФКУЗ Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Роспотребнадзора В ноябре 2012 г. из ФКУЗ «Алтайская противочумная станция» в Испытательный лабораторный центр института поступила проба мяса от вынужденно забитого теленка с подозрением на заболевание сибирской язвой. <...> Исследование было начато методом ПЦР в режиме реального времени с использованием тест-системы «Ампли-Сенс Bacillus anthracis-FRT» (ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора). <...> Экстракция ДНК из нативного материала, после предварительной герминации, инкубации с бензилпенициллина натриевой солью, лизиса гуанидинизотиоцианатом, осуществлялась сорбентным методом при помощи набора «ДНК-сорб-В» (ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора). <...> Постановка реакции амплификации и детекция результатов проводились на приборе «Rotor-Gene 6000» (Corbett Researche, Австралия). <...> При исследовании нативного материала обнаружен амплифицированный фрагмент гена плазмиды капсулообразования B. anthracis. <...> Для выделения чистой культуры из мяса и ее дальнейшей идентификации сделаны посевы на пластины казеиново-дрожжевого агара методом отпечатков, в бульон Хот тингера и поставлена биопроба (беспородные белые мыши). <...> Экстракция ДНК из 12ти часовых чистых культур осуществлялась сорбентным и термолизисным (20 минут, 98°С) методами. <...> При исследовании культуры, выделенной бактериологическим методом, отмечено отсутствие у нее генов плазмидной («Ампли-Сенс Bacillus anthracisFRT») и хромосомной («MULTI-FLU», ФБУН ГНЦ ПМБ Роспотребнадзора) локализаций, тогда как в культуре, выделенной через биопробное животное, все искомые гены были обнаружены. <...> Причинами возникших трудностей идентификации бактериологически выделенной первичной культуры с применением молекулярно-генетического метода, можно предположить малую копийность генов-мишеней из-за длительного <...>