№ 4 УДК 577.15.1 ВЛИЯНИЕ ЗАМЕНЫ ОСТАТКОВ Met НА ОСТАТОК Leu НА КАТАЛИТИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА, ОКИСЛИТЕЛЬНУЮ И ТЕМПЕРАТУРНУЮ СТАБИЛЬНОСТЬ ОКСИДАЗЫ D-АМИНОКИСЛОТ ДРОЖЖЕЙ Д.Л. <...> А.Н. Баха, Федеральный исследовательский центр «Фундаментальные основы биотехнологии» РАН; *e-mail: vitishkov@gmail.com) Окислительная стабильность ферментов определяется в первую очередь остатками Cys и Met. <...> В случае оксидазы D-аминокислот (DAAO, КФ 1.4.3.3) из дрожжей Trigonopsis variabilis (TvDAAO) методом направленного мутагенеза получены три мутеина с точечными заменами остатка Met на остаток Leu. <...> Выбор положений для введения замены сделан на основе множественного выравнивания аминокислотных последовательностей DAAO из разных источников, а также анализа трехмерной структуры TvDAAO. <...> Для полученных мутантов изучены каталитические свойства, а также температурная и окислительная стабильность. <...> Во всех случаях замена привела к изменению у мутантных ферментов профиля субстратной специфичности. <...> Наблюдается заметное увеличение констант Михаэлиса для небольших субстратов и уменьшению КМ для D-аминокислот с объемным боковым радикалом. <...> Разработана методика определения стабильности TvDAAO к действию пероксида водорода. <...> Изучена окислительная стабильность фермента дикого типа и полученных мутантных TvDAAO. <...> Установлено, что во всех случаях замена остатка Met на остаток Leu незначительно повлияла на окислительную стабильность фермента. <...> Ключевые слова: оксидаза D-аминокилот, Trigonopsis variabilis, направленный мутагенез, окислительная стабильность, каталитические свойства, температурная стабильность. <...> Оксидаза D-аминокислот (DAAO, КФ 1.4.3.3) относится к классу FAD-содержащих оксидоредуктаз и катализирует окислительное дезаминирование D-аминокислот в соответствующие -кетокислоты [1–4]. <...> Этот фермент выполняет важные функции в живых организмах. <...> . Кроме того, фермент используется для решения различных задач биотехнологии. <...> Второй фермент используется чаще, поскольку среди известных оксидаз D-аминокислот <...>