№ 2 УДК 577.152 СИНТЕЗ И ПРИМЕНЕНИЕ КОНЪЮГАТОВ ЛЮЦИФЕРАЗЫ СВЕТЛЯКОВ С АНТИТЕЛАМИ В БИОЛЮМИНЕСЦЕНТНОМ ИММУНОАНАЛИЗЕ КЛЕТОК Salmonella Г.Ю. <...> Угарова1 (1кафедра химической энзимологии, 2Филиал Института биоорганической химии имени М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова; е-mail: nugarova@gmail.com) Разработан метод синтеза стабильных и высокоактивных конъюгатов люциферазы светляков с антителами с использованием гетеробифункционального сшивающего агента N-сукцинимидил 3-(2-пиридилдитио) пропионата (SPDP) в качестве линкера NH2-групп антител со свободными SH-группами термостабильной Luciola mingrelica люциферазы (Luc). <...> Разработана новая специфическая матрица для сорбции клеток Salmonella: монодисперсные полистирольные микрочастицы (φ 240 нм) покрывали Плюроником F108-PDS, с которым затем ковалентно связывали моноклональные антитела к клеткам Salmonella (Sal). <...> Ключевые слова: люцифераза светляков, Luciola mingrelica, моноклональное антитело, конъюгация, детекция клеток, Salmonella, биолюминесцентный иммуноферментный анализ, Плюроник F10 Одна из важных задач биотехнологии и биоаналитической химии – развитие новых эффективных методов детекции микроорганизмов. <...> Наиболее широко используется гетерогенный иммуноанализ, в частности «сэндвич»-тип анализа, при котором антитела или другие биоспецифические молекулы иммобилизованы на полистирольных микроплашках. <...> Такой анализ занимает 1–3 ч и позволяет определять минимальную концентрацию клеток ~5Ч105 КОЕ/мл [1, 5]. <...> Сравнение разных методов детекции (микробиологический, ПЦР и иммуноферментный) для 215 образцов пищевых продуктов показало, что хотя иммуноферментный метод менее чувствителен, чем ПЦР, однако он более удобный и быстрый [6]. <...> Этим требованиям вполне отвечают методы детекции с использованием люциферазы светляков, которая катализирует окисление D-люциферина светляков кислородом воздуха в присутствии АТР и Mg2+. <...> Предложено много методов, основанных на использовании люциферазы светляков как непрямой метки [9, 10]. <...> Попытки <...>